酶聯(lián)免疫吸附試驗影響標(biāo)本處理因素和注意事項
標(biāo)本處理因素
實驗室人員收到標(biāo)本后應(yīng)認(rèn)真查對，對不符合要求的標(biāo)本和申請單要拘收，合格標(biāo)本要及時分離血清，避免溶血，提取血清時不應(yīng)混有大量纖維蛋白或細胞成分。對不能及時檢測的標(biāo)本要妥善保存于4℃冰箱，做好原始記錄，標(biāo)本管上標(biāo)上待檢者姓名、日期。ELISA試劑盒進口大鼠從冰箱取出的標(biāo)本要預(yù)溫至室溫，對冰凍的樣品要融化好，并充分混勻再用。
注意事項
1、操作前應(yīng)對實驗的物理參數(shù)有充分的了解，如環(huán)境溫度(保持在18 C～25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時間、洗滌的次數(shù)等，要先查看水育箱溫度，是否符合要求。
2、正確使用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標(biāo)本或試劑，避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺，血清殘留在反應(yīng)孔壁上，加樣器吸頭要清洗干凈，避免污染，加樣次序要與說明書一致，否則可導(dǎo)致結(jié)果錯誤，實驗重復(fù)性差。
3、手工洗板加洗液時沖擊力不要太大，洗滌次數(shù)不要超過說明書推薦的洗滌次數(shù)，洗液在反應(yīng)孔內(nèi)滯留的時間不宜太長。不要使洗液在孔間竄流，造成孔問污染，導(dǎo)致假陰性或假陽性。
4、ELISA試劑盒進口大鼠要保證加液量一致 我們在使用時感覺滴瓶加液不如加樣器好，滴瓶不易控制加液量不準(zhǔn)，造成顯色不統(tǒng)一，判斷錯誤。
5、顯色液量不可過多 加樣的工作環(huán)境不能處于陽光直射的環(huán)境下，加顯色系統(tǒng)后要避光反應(yīng)，顯色液量不能過多，以免顯色過強。
6、試劑的影響因數(shù)：應(yīng)選用有國家批準(zhǔn)文號，質(zhì)量靠得住的產(chǎn)品，不能圖便宜，忽視質(zhì)量保證。試劑應(yīng)妥善保存于4℃冰箱內(nèi)，在使用時先平衡至室溫，不同批號的試劑組分不宜交叉使用。試劑開啟后要在一周內(nèi)用完，剩余的試劑下次用時應(yīng)先檢查是否變質(zhì)，，顯色劑如被污染變色將造成全部顯色，導(dǎo)致錯誤結(jié)果。過期的試劑不宜再用，若別無選擇，ELISA試劑盒進口大鼠應(yīng)做好雙份質(zhì)控品的監(jiān)測，確保結(jié)果的可靠性。
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